Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie (LC-MS)
Flüssiges bzw. gelöstes Probenmaterial wird nach einer flüssigchromatographischen Trennung (HPLC) über eine Elektronenspray-Ionisation (ESI) zur Detektion in das Massenspektrometer eingebracht.
Prinzip
Hier ist eine vollständige Aufzeichnung der Massenspektren (bis m/z 1500) einzelner Substanzen als auch ein selected ion monitoring (SIM) (vgl. auch GC-MS) möglich. Zusätzlich kann auch eine UV-Detektion der gleichen Einspritzung vorgenommen werden.
Siehe Abbildung rechts oben.
Gerätekonfiguration
Vorhanden sind: | HPLC (Agilent 1100) mit MSD (Agilent 1100VL) |
UV-Detektor (Agilent 1100VWD) |
Siehe Abbildung rechts unten.
Analytische Bedingungen
- Flüssige Proben
- HPLC-Trennung (mobile und stationäre Phase sowie Gradienten sind frei wählbar)
In der jetzigen Ausbaustufe ESI (electrospray ionization); kein MS/MS und keine Spektrenbibliotheken verfügbar.
Probenmaterial
Flüssige Proben (z. B. biologische Flüssigkeiten), für andere Proben ist eine vorherige Extraktion erforderlich (z.B. Austauschersäulen)
Versuchsauswertung
- ESI-Massenspektren bis m/z 1500 als SIM (selected ion mode) oder vollständig aufnehmbar
- UV- und ggf. TIC-Chromatogramm können mit entsprechenden Standards quatitativ ausgewertet werden.
Kosten
- Je nach gewünschter Bestimmungsart mind. 200 € je 100 Messungen
- Ggf. Kaufpreis für analytische Säule
- Weitere Informationen auf Anfrage
Anwendungsbeispiel
Transport von humanen Milcholigosacchariden über ein Darmepithelzellen (Gnoth et al. 2001)
Weitere Anwendungen sind u.a. Fettsäuren, höhere Alkohole, Mono-, Di, Oligosaccharide, Vitamine/Mikronährstoffe (Lebensmittel, Körperflüssigkeiten und pharm. Präparate), aliphatische Kohlenwasserstoffe, Glykoside, Harnstoff, Aminosäuren und kleinere Proteine.
Referenzen
- Gnoth MJ, Rudloff S, Kunz C, Kinne RK Investigations of the in vitro transport of human milk oligosaccharides by a Caco-2 monolayer using a novel high performance liquid chromatography-mass spectrometry technique. J Biol Chem. 2001; 276:34363-70.